合理使用徠卡激光共聚焦顯微鏡
更新時間:2022-03-09 點擊次數(shù):670
徠卡激光共聚焦顯微鏡是近代生物醫(yī)學圖象儀器的重要發(fā)展之一,它是在成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針,利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖象,以及在亞細胞水平上觀察生理信號及細胞形態(tài)的變化。主要用于組織切片、活細胞的熒光標記、三維圖像重建分析研究;細胞生物物質(zhì)、離子的定性、定量、定時和定位分布檢測等,可以在同一張樣品上同時進行多重熒光標記觀察。對活細胞或組織切片進行連續(xù)掃描,可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng)的三維圖像。與普通熒光顯微鏡相比,具有更高對比度、解析度和高靈敏度。
在使用過程中如果使用和維護不當,常會出現(xiàn)一些問題,或者不能達到儀器的應(yīng)有的效果。所有這些情況,有的是由于使用不當所致,有的是由于維護不善,長年失修引起的。因此對徠卡激光共聚焦顯微鏡的合理使用和妥善維護是非常重要的:
1、在使用時,要根據(jù)使用要求選用適當?shù)姆糯蟊稊?shù)。
2、將各倍率的物鏡濃順序裝在轉(zhuǎn)換器上,在物鏡安裝前一定要將物鏡的螺紋和接觸端面以及轉(zhuǎn)換器的螺孔和接觸面部力構(gòu)應(yīng)清潔處理,不允許有任何灰塵存在,否則,會造成安裝不對而影響光學系統(tǒng)和成象質(zhì)量。
3、按所要觀察的標本切片放置在工作臺面上,并用壓片將標本切片壓緊,如有移動尺的顯微a,可用卡腳將標本切片卡平穩(wěn),不然當移動只作縱向或橫向移動時,觀察的象團不穩(wěn)定,當然這也有可6曙由于移動尺本身質(zhì)量不好所致。如有象質(zhì)不穩(wěn)定時,則可作適量的微調(diào)即能彌補這個缺點。如果發(fā)現(xiàn)微調(diào)值太大時,這說明移動尺作縱向或橫向移動的軌跡線不平行于工作臺面,或可能是工作臺面的不平皮。在這種情況下,應(yīng)將顯微鏡送檢修單位進行修理。
4、在觀察標本切片時,必然要進行調(diào)焦,首先是祖調(diào),而后是微調(diào)。在根調(diào)時應(yīng)根據(jù)不同倍率物鏡的工作距離作粗購的調(diào)節(jié),接著用眼觀察目鏡作粗調(diào),直至能看到標本的輪廓后再進行微調(diào)。
5、在觀察標本切片時,需要有一定的照明,其照明的光源有自然光源和人工光源兩種,不管用那種光源,為使在觀察時能得到清晰的物象,共亮度要合
適。